更新時(shí)間: | 2023-10-10 |
型 號(hào): | |
所屬分類: | 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) |
報(bào) 價(jià): | 1200 |
承接實(shí)驗(yàn)外包服務(wù):一、分子生物學(xué)檢測(cè)服務(wù)二、病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)三、蛋白質(zhì)技術(shù)服務(wù)1、免疫印跡(Western-blotting)分析2、蛋白質(zhì)組學(xué)3、凝膠遷滯實(shí)驗(yàn)(EMSA)分析DNA或RNA結(jié)合蛋白四、免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù)五、代謝組學(xué)1、GC-MS、LC-MS、NMRTaqman探針生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
服務(wù)項(xiàng)目 | 終端報(bào)價(jià) | 說(shuō)明 | 實(shí)驗(yàn)周期 |
SYBR Green染料法(單孔) | 80元/例/基因 | 包含引物設(shè)計(jì)合成、提取、逆轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增.內(nèi)參免費(fèi)(多樣本多基因可優(yōu)惠6-8折) | 1至2周內(nèi) |
SYBR Green染料法(兩重復(fù)) | 100元/例/基因 | ||
SYBR Green染料法(三重復(fù)) | 120元/例/基因 | ||
DNA提取 | 30元/樣本 | 包含濃度測(cè)定 | 1周內(nèi) |
RNA提取 | 35元/樣本 | ||
miRNA定量檢測(cè)(單孔) | 90元/例/基因 | 包含引物設(shè)計(jì)合成、提取、逆轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增.內(nèi)參免費(fèi) | 1至2周內(nèi) |
lcnRNA定量檢測(cè)(單孔) | 90元/例/基因 | ||
siRNA合成 | 1000元/條 | 包含siRN及NC各一條 | 2至3周內(nèi) |
Taqman探針 | 1200元/條 | 包含探針一條及上下游引物一對(duì) | 1至2周內(nèi) |
SNP檢測(cè) | 100元/例/位點(diǎn) | 包含DNA提取、擴(kuò)增、測(cè)序 | 2至3周內(nèi) |
實(shí)驗(yàn)意義
熒光定量PCR (Realtime fluorescence quantitative PCR, qPCR)也稱作實(shí)時(shí)熒光定量PCR。就是在PCR的擴(kuò)增過(guò)程中,通過(guò)熒光的信號(hào),對(duì)PCR的進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)的定性、定量檢測(cè), 后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)初始模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測(cè)方式有SYBR Green染料法和Taqman探針法兩種方式。
探針?lè)ㄅc染料法的優(yōu)缺點(diǎn)
1.探針?lè)ㄍㄟ^(guò)探針可以增加反應(yīng)收集信號(hào)的特異性,只有探針結(jié)合的片段上發(fā)生擴(kuò)增才能收集到信號(hào),能夠用多重體系反應(yīng)的方法,能夠預(yù)測(cè)和提前進(jìn)行反應(yīng)條件的優(yōu)化,缺點(diǎn)是要合成探針,成本高,周期長(zhǎng)。
2.染料法經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,可以做溶解曲線,分析全部PCR產(chǎn)物的TM值,缺點(diǎn)就是特異性沒(méi)有探針?lè)ê谩?/span>
實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存方法:
1:病理標(biāo)本收集及保存:
1)冰凍切片:取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于液氮保存;
2)石蠟切片:取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于4%多聚甲醛保存;
3)細(xì)胞爬片:細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定30min,換PBS浸沒(méi)4℃保存。
2:分子生物學(xué)標(biāo)本收集及保存:
1)新鮮組織:切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)石蠟標(biāo)本:常溫保存;
3)全血標(biāo)本:取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
4)體液標(biāo)本:高速離心取沉淀;
5)細(xì)胞標(biāo)本:細(xì)胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
3:蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存:
1)新鮮組織:切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)全血標(biāo)本:取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
3)細(xì)胞標(biāo)本:細(xì)胞加細(xì)胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
4:ELISA、放免、生化實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存:
1)血清(血漿)樣本:取全血加入促凝管(抗凝管),2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,收集上清,液氮或者-80℃冰箱保存;
2)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液參照此實(shí)行;
3)細(xì)胞樣本:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS稀釋細(xì)胞懸液,通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,收集上清同上;
4)組織樣本:切割標(biāo)本后,稱取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?/span>。
5:代謝組學(xué)標(biāo)本收集:
1)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等參照此實(shí)行;
2)組織樣本切割標(biāo)本后,稱取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?/span>;
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